MINI GENOMIC DNA KIT (PLANT/FUNGI)

Opis towaru

MINI GENOMIC DNA KIT (PLANT/FUNGI)

• Wielkość próbki: do 100 mg świeżej tkanki roślinnej / 25 mg suchej tkanki roślinnej
• Oczekiwana wydajność: 3-5 µg (100 mg liścia Arabidopsis thaliana) 20-25 µg (100 mg liścia Nicotiana tabacum)
• Format: kolumienkowy
• Czas pracy: ≤30 minut
• Objętość elucji: 30-200 µl

Zestaw Genomic DNA Mini Kit (PLANT/FUNGI) zapewnia szybką i ekonomiczną metodę izolacji całkowitego DNA (DNA genomowego, mitochondrialnego i chloroplastu) z tkanki i komórek roślinnych. Próbki rozbija się zarówno przez mielenie w ciekłym azocie, jak i inkubację w buforze do lizy. Lizat traktuje się RNazą A w celu degradacji RNA i filtruje w celu usunięcia resztek komórek i osadów soli. W obecności buforu wiążącego sprzężonego z solą chaotropową, genomowy DNA w lizacie wiąże się z matrycą z włókna szklanego kolumny. Zanieczyszczenia przemywa się buforem do przemywania na bazie etanolu. Następnie genomowy DNA wymywa się buforem elucyjnym o niskiej zawartości soli lub wodą. Protokół nie wymaga ekstrakcji DNA fenolem ani wytrącania alkoholem. Cała procedura może być zakończona w 30 minut, a oczyszczony genomowy DNA jest gotowy do PCR, Real-Time PCR, Southern Blotting lub RFLP.

Kontrola jakości

Jakość zestawu Genomic DNA Mini Kit for Plant jest testowana na zasadzie „lot-to-lot” poprzez izolację genomowego DNA z 50 mg próbek młodych liści. Ponad 10 µg genomowego DNA jest oznaczane ilościowo za pomocą spektrofotometru i sprawdzane za pomocą elektroforezy.

Najczęściej zadawane pytania

Dlaczego uzyskuję niską wydajność podczas pracy z korzeniem? Zestaw nie będzie działał tak dobrze z korzeniami ze względu na wysoką zawartość polisacharydów w korzeniu. Zestawy IB47230 i IB47231 zawierają bufor GPX1, który działa lepiej z próbkami o niskiej zawartości polisacharydów.

Czy ten zestaw może być używany do ryb lub ssaków? Nie, bufory w tym zestawie są ukierunkowane na rozkład składników specyficznych dla roślin. Może to również wpłynąć na wiązanie DNA.

Klient dysponuje materiałem roślinnym o fakturze trocin.Czy próbka musi być jeszcze mielona?

Ta tekstura będzie pasowała do tego zestawu.

Jak usunąć nadmiar oleju z próbek roślin?

1. Odciąć 100 mg świeżej tkanki roślinnej lub 50 mg suchej tkanki roślinnej.

2. Zamrozić próbkę w ciekłym azocie.

3. Zmielić próbkę na drobny proszek za pomocą moździerza i tłuczka.

4. Dodać 400 µl buforu GP1 lub GPX1 Buffer i 5 µl RNAzy A (96-well genomic DNA kit plant) lub 1 ml IBI Plant Isolate i 0,5 µl RNAzy A (IBI Plant Isolate) do próbki w moździerzu.

5. Kontynuować mielenie próbki aż do całkowitego rozpuszczenia, a następnie przenieść lizat próbki do 1,5 ml probówki mikrowirówkowej.

6. Inkubuwać lizat próbki w 65°C przez 10–30 minut, a następnie wiruj przy 14–16 000 x g przez 5 minut.

7. Na wierzchu unosi się warstwa oleju; przenieść „klarowny supernatant” tylko do czystej 1,5 ml probówki mikrowirówkowej, a następnie postępować zgodnie z protokołem.

Jak mały fragment wirusowego DNA można wyekstrahować z próbki rośliny za pomocą zestawu Mini Genomic DNA Plant Kit?

Może wyodrębniać fragmenty tak małe jak 100 bp z roślin zakażonych wirusem.