PLANT ISOLATE DNA EXTRACTION KIT

Opis towaru

PLANT ISOLATE DNA EXTRACTION KIT

• Wielkość próbki: do 1 g świeżej tkanki roślinnej lub 0,5 g suchej tkanki roślinnej
• Wydajność: zależna od wielkości próbki
• Czas pracy: ≤60 minut

Zestaw IBI Plant Isolate zapewnia szybką i łatwą 3-stopniową metodę opartą na CTAB i chloroformie do izolowania całkowitego DNA (w tym DNA genomowego, mitochondrialnego i chloroplastowego) z różnych gatunków roślin (w tym alg i cyjanobakterii). Ten wyjątkowy odczynnik jest w stanie dokonać lizy większości popularnych próbek roślin, a także próbek roślin o wysokiej zawartości polisacharydów. Wyekstrahowany DNA nadaje się do rutynowych badań przesiewowych PCR, RT-PCR, Southern Blotting, mapowania i RFLP. Ekstrakcja fenolu nie jest wymagana, a całą procedurę można zakończyć w ciągu 50 minut.

Kontrola jakości

IBI Plant Isolate jest testowany na zasadzie „lot-to-lot”. 50 mg świeżych liści Arabidopsis jest wstępnie mielonych IBI Plant Isolate. Porcję 15 µl wyekstrahowanego genomowego DNA ze 100 µl eluatu analizuje się przez elektroforezę w 1% żelu agarozowym.

Najczęściej zadawane pytania

Jak usunąć nadmiar oleju z próbek roślin?

1. Odciąć 100 mg świeżej tkanki roślinnej lub 50 mg suchej tkanki roślinnej.

2. Zamrozić próbkę w ciekłym azocie.

3. Zmielić próbkę na drobny proszek za pomocą moździerza i tłuczka.

4. Dodać 400 µl buforu GP1 lub GPX1 Buffer i 5 µl RNAzy A (96-well genomic DNA kit plant) lub 1 ml IBI Plant Isolate i 0,5 µl RNAzy A (IBI Plant Isolate) do próbki w moździerzu.

5. Kontynuować mielenie próbki aż do całkowitego rozpuszczenia, a następnie przenieść lizat próbki do 1,5 ml probówki mikrowirówkowej.

6. Inkubować lizat próbki w 65°C przez 10–30 minut, a następnie wiruj przy 14–16 000 x g przez 5 minut.

7. Na wierzchu unosi się warstwa oleju; przenieść „klarowny supernatant” tylko do czystej 1,5 ml probówki mikrowirówkowej, a następnie postępować zgodnie z protokołem.

Po zastosowaniu produktu Plant Isolate określiliśmy stężenie DNA zarówno na podstawie absorbancji, jak i fluorescencji i otrzymaliśmy bardzo zróżnicowane wyniki.

Dlaczego? Zanieczyszczenie RNA nie wpłynie na stężenie DNA podczas stosowania fluorescencji. Zanieczyszczenie RNA wpłynie na wyniki stężenia DNA, gdy zostanie określone przez absorbancję. Zwiększ ilość używanej RNAzy A.