I-BLUE MINI PLASMID KIT

Opis towaru

I-BLUE MINI PLASMID KIT

• Wielkość próbki: 1-7 ml kultury bakteryjnej
• Oczekiwana wydajność: do 50 µg czystego plazmidowego DNA
• Format: Kolumienki
• Objętość elucji: 30-100 µl
• Czas pracy: ≤20 minut

Zestaw I-Blue Mini Plasmid Kit został zaprojektowany do szybkiej izolacji plazmidowego DNA z 1-7 ml hodowanych komórek bakteryjnych.

Bufor do lizy I-Blue (opcjonalny wskaźnik koloru) jest dołączony do zestawu, aby zapobiec typowym błędom w obsłudze, zapewniając skuteczną lizę i neutralizację komórek.

Zmodyfikowaną metodę lizy alkalicznej i traktowanie RNazą stosuje się w celu uzyskania czystego lizatu komórkowego z minimalną ilością zanieczyszczeń genomowym DNA i RNA.

Ekstrakcja DNA fenolem lub wytrącanie alkoholem nie jest wymagana, a całą procedurę można zakończyć w 20 minut.

Oczyszczony plazmidowy DNA jest gotowy do użycia w trawieniu enzymami restrykcyjnymi, ligacji PCR i reakcjach sekwencjonowania.

Kontrola jakości

Jakość zestawu I-Blue Mini Plasmid Kit jest testowana na zasadzie „lot-to-lot” poprzez izolację plazmidowego DNA z 4 ml hodowli E. coli (DH5α), zawierającej plazmid pBluescript (A600> 2U / ml). Po procesie oczyszczania oczekuje się wydajności powyżej 30 µg, a stosunek A260 / A280 wynosi 1,8-2,0. Oczyszczony plazmidowy DNA (1 µg) zastosowano do trawienia EcoRI i sprawdzono przez elektroforezę.

Najczęściej zadawane pytania:

Jaki zestaw konkurencji jest porównywalny?

QIAGEN QIAprep Spin Miniprep Kit lub QIAGEN QuickLyse Miniprep Kit

Czy odczynniki QIAGEN mogą być używane z kolumnami IBI?

Tak, wszystko, co jest oparte na lizie, będzie działać.

Czy stosowanie ampicyliny lub innych antybiotyków podczas hodowli E. coli jest konieczne do uzyskania odpowiedniej wydajności z zestawem mini plazmidów I-Blue?

Tak, aby uzyskać dobrą wydajność, bakterie E. coli należy zestresować antybiotykiem.

Jak zwiększyć wydajność tego zestawu?

1. Wydłuż czas lizy

2. Podgrzej wstępnie bufor do elucji

3. Wykonaj etap elucji dwukrotnie

4. W przypadku dużej / stężonej próbki użytkownik końcowy może dodać dodatkowe bufory PD1,2,3. 5. Zobacz przewodnik dotyczący rozwiązywania problemów w protokole.

Jaka jest maksymalna ilość próbki dla kolumny / probówki I-Blue Mini Plasmid?

Maksymalna ilość próbki wynosi od 1 do 7 ml.

Jaki jest podstawowy skład buforu do elucji?

Głównym składnikiem buforu do elucji jest Tris-HCl pH 8,5. Bufor ten nie zawiera EDTA. Można również użyć czystej wody lub buforu TE.

Jaka jest rola buforu W1 w porównaniu z buforem płuczącym?

W1 zawiera sól chaotropową i etanol. Sól chaotropowa może hamować i usuwać aktywność enzymów, takich jak polimeraza Taq i endonukleaza.

Wash Buffer zawiera niskie stężenia soli i usunie sole i białka z końcowej próbki.

Jaka jest różnica między Hi-Speed Mini Plasmid Kit a I-Blue Mini Plasmid Kit?

Różnice dotyczą 2-krotnej objętości RNAzy A i I-Blue Lysis Buffer w I-Blue Mini. Większa objętość RNAzy A zwiększa wydajność w przypadku większych objętości próbek.

Hi Speed Mini pozwala na 1-5 ml, a I-Blue Mini na 1-7 ml, co da więcej plazmidowego DNA. Wszystkie inne bufory są takie same.