TRI-ISOLATE RNA PURE KIT

Opis towaru

IBI Tri-Isolate to zestaw zawierający fenol, izotiocyjanian guanidyny oraz system kolumienkowy do wygodnego oczyszczania wysokiej jakości całkowitego RNA z różnych próbek, w tym hodowanych komórek, tkanek, płynów ustrojowych, bakterii i tkanek roślinnych.

• Wielkość próbki: do 5 x 10⁶ hodowanych komórek, 10 - 50 mg tkanki, do 200 µl płynów ustrojowych (krew, kożuszek, surowica, osocze), 1 x 10⁹ komórek bakteryjnych, 20 - 50 mg tkanki roślinnej
• Czas pracy: 15 minut lub mniej
• Zdolność wiązania: 50 µg RNA z > 25 µl wody wolnej od DNaz/RNaz
• Objętość elucji: 25 - 50 µl
• Brak wytrącania RNA izopropanolem
• Brak przenoszenia fenolu
• Wysokiej jakości RNA: A260 / A280> 1,8, A260 / A230> 1,8
• Przechowywanie: temperatura pokojowa (wyjątek: DNaza I i lizozym po dostarczeniu należy przechowywać w temperaturze -20 °C)

Początkowo próbki homogenizuje się w odczynniku IBI Isolate Reagent bez rozdziału faz chloroformem lub wytrącania RNA izopropanolem. Po homogenizacji próbki wystarczy związać, przemyć i wymyć wysokiej jakości całkowity RNA w wodzie wolnej od RNaz.

Oczyszczone RNA można wykorzystać w wielu dalszych zastosowaniach, w tym w konstruowaniu biblioteki cDNA, klonowaniu, RT-PCR (punkt końcowy), PCR w czasie rzeczywistym, testach ochrony przed nukleazami, Northern blotting.

Kontrola jakości:

IBI Tri-Isolate jest testowany na zasadzie „lot-to-lot”. 10 µl z 50 µl eluatu oczyszczonego RNA analizowano przez elektroforezę na 0,8% żelu agarozowym.

Najczęściej zadawane pytania:

Czy z zestawem Tri-Isolate można używać zamrożonych próbek krwi?

Tak. Umieść zamrożoną próbkę w 1,5ml probówce mikrowirówkowej, dodaj 3 objętości odczynnika Tri-Isolate i pozwól próbce się rozmrozić. Inkubuj dodatkowe 5 minut w temperaturze pokojowej i przejdź do pozostałej części protokołu.

Czy można zmienić protokół, aby pomieścić próbki o wysokiej zawartości lipidów, takie jak tkanka mózgowa?

Tak. Po homogenizacji odwirować próbkę przy 12 000 - 16 000 x g przez 2 minuty w celu usunięcia nierozpuszczalnych cząstek. Po odwirowaniu próbek o wysokiej zawartości tłuszczu, na supernatancie unosi się warstwa tłuszczu. Usuń i wyrzuć warstwę tłuszczową, a następnie przenieś supernatant do nowej probówki wirówkowej o pojemności 1,5 ml. Kontynuuj krok # 2 wiązania RNA.