Corning® DMEM (Dulbecco’s Modified Eagle’s Medium)

Opis towaru

Corning® DMEM – Dulbecco’s Modified Eagle’s Medium to jedna z najczęściej wykorzystywanych klasycznych pożywek do hodowli komórek ssaczych. Stanowi zmodyfikowaną wersję Basal Medium Eagle – BME, zawierającą czterokrotnie większe stężenia aminokwasów i witamin niż pożywka bazowa. Pierwotna formulacja była stosowana do hodowli zarodkowych komórek mysich, a jej późniejsze warianty opracowano z myślą o wielu typach komórek prawidłowych i transformowanych, w tym pierwotnych komórkach mysich i kurzych.

Szeroki wybór formulacji Corning® DMEM umożliwia dopasowanie pożywki do wymagań konkretnej linii komórkowej i prowadzonego eksperymentu. Dostępne warianty różnią się między innymi stężeniem glukozy oraz obecnością L-glutaminy, pirogronianu sodu, buforu HEPES, czerwieni fenolowej i wodorowęglanu sodu.

Bogata formulacja do hodowli komórek ssaczych

DMEM dostarcza komórkom podstawowych aminokwasów, witamin, soli nieorganicznych i źródła energii niezbędnych do utrzymania wzrostu oraz metabolizmu in vitro. Zwiększona w stosunku do BME zawartość aminokwasów i witamin sprawia, że pożywka może być wykorzystywana do hodowli wielu wymagających linii komórkowych.

W zależności od wybranego wariantu medium może zawierać 1,0 g/l glukozy, odpowiadające klasycznej formulacji niskoglukozowej, lub 4,5 g/l glukozy, stosowane w wariantach wysokoglukozowych. Dostępna jest również specjalistyczna płynna wersja bez glukozy, przeznaczona między innymi do pracy z komórkami wrażliwymi na jej obecność oraz do badań metabolicznych.

Warianty nisko- i wysokoglukozowe

Wybór stężenia glukozy powinien uwzględniać metabolizm badanego typu komórek oraz wymagania stosowanego protokołu.

Pożywki z 1,0 g/l glukozy są zbliżone do pierwotnej formulacji DMEM. Przykładem jest wariant 10-014-CV lub 10-014-CM, zawierający dodatkowo L-glutaminę i pirogronian sodu.

Warianty z 4,5 g/l glukozy są dostępne w wielu konfiguracjach – z L-glutaminą, pirogronianem sodu, obydwoma składnikami lub bez nich. Pozwala to kontrolować sposób suplementacji medium i dostosować skład pożywki do wymagań hodowanej linii komórkowej.

Formulacje z L-glutaminą lub bez L-glutaminy

L-glutamina jest ważnym źródłem energii i azotu dla wielu hodowanych komórek, ale w roztworach wodnych ulega stopniowemu rozpadowi. Corning oferuje zarówno pożywki zawierające L-glutaminę, jak i warianty bez tego składnika, które umożliwiają samodzielne dodanie świeżej glutaminy lub wybranego stabilnego suplementu bezpośrednio przed użyciem.

Przykładowo warianty 10-013 zawierają 4,5 g/l glukozy, L-glutaminę i pirogronian sodu, natomiast formulacje 15-013 zawierają glukozę i pirogronian sodu, ale nie zawierają L-glutaminy. Warianty 15-017 nie zawierają ani L-glutaminy, ani pirogronianu sodu.

Stabilny suplement Corning glutagro™

Wybrane formulacje DMEM zawierają Corning glutagro™ zamiast standardowej L-glutaminy. Jest to stabilniejszy suplement glutaminowy przeznaczony do długotrwałego utrzymywania odpowiedniego źródła glutaminy w pożywce.

Wariant 10-101-CV zawiera glutagro™, 4,5 g/l glukozy, pirogronian sodu i czerwień fenolową. Wariant 10-102-CV zawiera glutagro™, 4,5 g/l glukozy i czerwień fenolową, ale nie zawiera pirogronianu sodu.

Formulacje buforowane HEPES

Pożywki zawierające 25 mM HEPES zapewniają dodatkową zdolność buforowania pH. Mogą być przydatne w procedurach, podczas których naczynia hodowlane przez pewien czas pozostają poza inkubatorem z kontrolowaną atmosferą CO₂.

Wariant 10-027-CV zawiera 25 mM HEPES, 4,5 g/l glukozy i L-glutaminę, ale nie zawiera pirogronianu sodu. Formulacje 15-018-CV i 15-018-CM zawierają 25 mM HEPES, 4,5 g/l glukozy i pirogronian sodu, lecz nie zawierają L-glutaminy.

Pożywka z czerwienią fenolową lub bez wskaźnika pH

Czerwień fenolowa ułatwia wizualną ocenę zmian pH pożywki podczas hodowli. W zastosowaniach, w których wskaźnik może wpływać na pomiary lub analizę biologiczną, dostępne są warianty bez czerwieni fenolowej.

Przykładem jest DMEM 17-205-CV, zawierający 4,5 g/l glukozy i pirogronian sodu, ale pozbawiony L-glutaminy oraz czerwieni fenolowej.

Specjalistyczna pożywka DMEM bez glukozy

Corning® DMEM 17-207-CV nie zawiera glukozy, L-glutaminy ani pirogronianu sodu. Płynna formulacja jest przeznaczona do pracy z komórkami wrażliwymi na glukozę oraz do badań metabolicznych, w których wymagane jest samodzielne kontrolowanie jej końcowego stężenia. Gotowa postać płynna ogranicza czas przygotowania w porównaniu z medium dostępnym wyłącznie w proszku.

Kontrola jakości pożywek Corning®

Pożywki Corning® DMEM są poddawane testom wzrostowym i badaniom cytotoksyczności. Ich działanie jest oceniane na podstawie przyrostu komórek zgodnie z określonymi kryteriami akceptacji. Produkty płynne i proszkowe są również kontrolowane pod kątem pH oraz osmolalności, a w przypadku pożywek w proszku sprawdzana jest także wilgotność resztkowa.

Dla każdej partii dostępny jest certyfikat analizy oraz pełna informacja o formulacji. Producent deklaruje wytwarzanie produktów w zakładzie działającym w ramach systemu jakości certyfikowanego zgodnie z ISO 13485.

Najważniejsze zalety

• klasyczna pożywka do hodowli komórek ssaczych,
• czterokrotnie wyższe stężenia aminokwasów i witamin niż w BME,
• szeroki wybór formulacji dopasowanych do różnych protokołów,
• warianty z 1,0 lub 4,5 g/l glukozy,
• dostępna specjalistyczna formulacja bez glukozy,
• warianty z L-glutaminą lub bez L-glutaminy,
• dostępne pożywki ze stabilnym suplementem Corning glutagro™,
• wersje z pirogronianem sodu lub bez niego,
• formulacje buforowane 25 mM HEPES,
• warianty z czerwienią fenolową i bez czerwieni fenolowej,
• testy wzrostowe, cytotoksyczności, pH i osmolalności,
• certyfikat analizy dostępny dla każdej partii.

Zastosowanie

Corning® DMEM może być wykorzystywany między innymi do:

• hodowli prawidłowych i transformowanych komórek ssaczych,
• hodowli pierwotnych komórek mysich i kurzych,
• hodowli komórek zarodkowych,
• namnażania wielu adherentnych linii komórkowych,
• badań biologii komórki,
• badań nowotworowych,
• testów cytotoksyczności,
• badań metabolizmu komórkowego,
• przygotowywania kompletnych pożywek wzrostowych,
• hodowli wymagających indywidualnie dobranej suplementacji.

Dobór konkretnej formulacji, suplementów i stężenia surowicy powinien być zgodny z wymaganiami wykorzystywanej linii komórkowej oraz zatwierdzonym protokołem badawczym.

Podstawowe parametry

 Warunki przechowywania

Wymienione płynne warianty Corning® DMEM należy przechowywać zgodnie z informacją znajdującą się na etykiecie danego produktu. Dla wielu standardowych formulacji producent wskazuje temperaturę od 2°C do 8°C. Przed zastosowaniem należy sprawdzić datę ważności, pełny skład oraz certyfikat analizy właściwy dla danej partii.