Corning® Collagen

Opis towaru

Corning® Collagen to naturalne białka macierzy zewnątrzkomórkowej przeznaczone do modyfikowania powierzchni hodowlanych oraz przygotowywania żeli kolagenowych. Produkty umożliwiają tworzenie środowiska hodowlanego lepiej odzwierciedlającego warunki występujące w organizmie, dzięki czemu mogą być wykorzystywane zarówno w klasycznych hodowlach dwuwymiarowych, jak i w modelach trójwymiarowych.

Oferta obejmuje kolagen typu I i IV pochodzący ze źródeł bydlęcych, szczurzych, mysich i ludzkich. Poszczególne warianty różnią się pochodzeniem, stężeniem, sposobem przygotowania oraz zalecanym zastosowaniem. Pozwala to dopasować macierz do badanego typu komórek, modelu tkankowego i charakteru eksperymentu.

Biologicznie aktywne podłoże dla komórek

Macierz zewnątrzkomórkowa nie pełni wyłącznie funkcji mechanicznego rusztowania. Jej składniki uczestniczą w regulacji przyłączania, rozprzestrzeniania, wzrostu, migracji, różnicowania oraz organizacji przestrzennej komórek.

Zastosowanie kolagenu Corning® może poprawiać przyłączanie komórek do standardowych naczyń hodowlanych, wspierać ich proliferację oraz pomagać w utrzymaniu morfologii i funkcji charakterystycznych dla danego typu komórek. Produkty mogą być nanoszone jako cienka warstwa na szalki, płytki, kolby lub inserty hodowlane, a wybrane warianty mogą również służyć do przygotowywania żeli 3D.

Kolagen typu I – do powlekania powierzchni i tworzenia żeli

Kolagen typu I może być stosowany jako cienka warstwa pokrywająca powierzchnię hodowlaną, której zadaniem jest zwiększenie adhezji i proliferacji komórek. W postaci żelu tworzy przestrzenną macierz umożliwiającą komórkom wzrost w środowisku 3D oraz ekspresję morfologii i funkcji charakterystycznych dla określonego modelu komórkowego.

Corning oferuje kolagen typu I pochodzący ze skóry właściwej bydła, ścięgien ogona szczura oraz ludzkiego łożyska. Dostępny jest również wysokostężony kolagen typu I ze ścięgien ogona szczura, przeznaczony przede wszystkim do przygotowywania żeli trójwymiarowych.

Kolagen typu IV – składnik błon podstawnych

Kolagen typu IV jest jednym z głównych składników błon podstawnych. Tworzy strukturę występującą w bliskim otoczeniu między innymi komórek nabłonkowych, mięśniowych i nerwowych. Może uczestniczyć w regulacji wzrostu, różnicowania i organizacji tkanek.

W hodowli komórkowej jest stosowany przede wszystkim jako cienka powłoka wspomagająca przyłączanie i proliferację komórek oraz umożliwiająca badanie wpływu kolagenu na ich zachowanie. Corning oferuje kolagen typu IV pochodzący z ludzkiego łożyska oraz mysiego guza Engelbreth-Holm-Swarm – EHS.

Powlekanie powierzchni hodowlanych

Kolagen może być nanoszony na standardowe powierzchnie do hodowli komórkowej, tworząc biologicznie aktywną warstwę wspomagającą adhezję komórek. Rozwiązanie to może być szczególnie przydatne podczas pracy z:

• komórkami pierwotnymi,
• komórkami słabo przyłączającymi się do standardowego polistyrenu,
• liniami wymagającymi kontaktu ze składnikami macierzy zewnątrzkomórkowej,
• komórkami nabłonkowymi i śródbłonkowymi,
• fibroblastami,
• komórkami mięśniowymi,
• komórkami nerwowymi,
• komórkami wykorzystywanymi w badaniach migracji i różnicowania.

Zalecane stężenie powłoki zależy od typu kolagenu, źródła białka oraz właściwości hodowanych komórek. Dla kolagenu typu I pochodzenia bydlęcego i szczurzego producent wskazuje zazwyczaj 5–10 µg/cm². Dla ludzkiego kolagenu typu I zalecany zakres wynosi 0,2–2 µg/cm², natomiast dla kolagenu typu IV – od 1 do 10 µg/cm², zależnie od wariantu.

Żele kolagenowe do hodowli 3D

Wybrane warianty kolagenu typu I mogą być wykorzystywane do przygotowywania trójwymiarowych żeli. Takie rusztowanie zapewnia komórkom możliwość wzrostu i interakcji z macierzą we wszystkich kierunkach, dzięki czemu lepiej odwzorowuje architekturę tkanki niż klasyczna hodowla na płaskiej powierzchni.

Wysokostężony kolagen typu I ze ścięgien ogona szczura jest dostarczany w stężeniu 8–11 mg/ml i został opracowany z myślą o zastosowaniach 3D. Według producenta tworzy stabilny żel przy stężeniu do 0,3 mg/ml, przy czym dalsze rozcieńczanie może zmniejszać sztywność powstałej macierzy.

Standardowe warianty kolagenu typu I pochodzenia bydlęcego i szczurzego również mogą być stosowane jako żel lub cienka powłoka. Odpowiednie stężenie oraz procedurę żelowania należy dobrać do rodzaju komórek, oczekiwanej sztywności macierzy i założeń eksperymentu.

Dobór źródła kolagenu

Źródło kolagenu może mieć znaczenie dla odpowiedzi biologicznej komórek, odtwarzanego modelu tkankowego oraz wymagań eksperymentalnych.

• Kolagen bydlęcy typu I – pozyskiwany ze skóry właściwej bydła; przeznaczony do powlekania powierzchni i tworzenia żeli.
• Kolagen szczurzy typu I – pozyskiwany ze ścięgien ogona szczura; dostępny w wariancie standardowym i wysokostężonym.
• Kolagen ludzki typu I – pozyskiwany z ludzkiego łożyska; odpowiedni do modeli wymagających zastosowania białka pochodzenia ludzkiego.
• Kolagen mysi typu IV – pozyskiwany z guza EHS; stosowany głównie do powlekania powierzchni.
• Kolagen ludzki typu IV – pozyskiwany z ludzkiego łożyska; przeznaczony do badań komórek związanych z błonami podstawnymi.

Najważniejsze zalety

• naturalne składniki macierzy zewnątrzkomórkowej,
• możliwość prowadzenia hodowli 2D i 3D,
• wspomaganie przyłączania i rozprzestrzeniania komórek,
• możliwość zwiększenia proliferacji wybranych typów komórek,
• wsparcie utrzymania specyficznej morfologii i funkcji komórkowej,
• możliwość badania wpływu macierzy na zachowanie komórek,
• warianty kolagenu typu I i IV,
• źródła bydlęce, szczurze, mysie i ludzkie,
• możliwość nanoszenia cienkich powłok na powierzchnie hodowlane,
• dostępny wysokostężony wariant do przygotowywania żeli 3D,
• kontrolowana czystość białka,
• testy funkcjonalne potwierdzające zdolność wspomagania adhezji komórek,
• kontrola pod kątem bakterii, grzybów i mykoplazmy.

Zastosowanie

Corning® Collagen może być wykorzystywany między innymi do:

• powlekania naczyń i płytek do hodowli komórkowej,
• powlekania insertów z membraną przepuszczalną,
• poprawy adhezji komórek,
• hodowli komórek pierwotnych,
• hodowli fibroblastów,
• hodowli komórek nabłonkowych i śródbłonkowych,
• hodowli komórek mięśniowych i nerwowych,
• badań proliferacji i różnicowania,
• badań migracji komórkowej,
• tworzenia modeli błon podstawnych,
• przygotowywania żeli do hodowli trójwymiarowej,
• hodowli organotypowych,
• modeli tkanek i chorób,
• badań nowotworowych,
• badań nad oddziaływaniami komórka–macierz,
• testów farmakologicznych i toksykologicznych.

Kontrola jakości

Poszczególne warianty kolagenu są oceniane metodą SDS-PAGE oraz poddawane testom funkcjonalnym. Kolagen typu I pochodzenia bydlęcego i szczurzego jest testowany pod kątem zdolności wspomagania przyłączania i rozprzestrzeniania komórek ludzkiego włókniakomięsaka HT-1080. Kolagen typu IV pochodzenia mysiego jest testowany z wykorzystaniem komórek NG-108.

Produkty są również kontrolowane pod kątem obecności bakterii, grzybów i mykoplazmy. Deklarowana czystość zależy od wariantu i wynosi co najmniej 90% lub więcej, natomiast produkty z kolagenu ludzkiego charakteryzowane są jako jednorodne elektroforetycznie.

Podstawowe parametry serii

Warunki przechowywania i przygotowania

Warunki przechowywania różnią się w zależności od źródła i rodzaju kolagenu. Kolagen typu I pochodzenia bydlęcego oraz standardowy i wysokostężony kolagen ze ścięgien ogona szczura należy przechowywać w temperaturze 2–8°C i nie zamrażać.

Ludzki kolagen typu I należy przechowywać w temperaturze –20°C, natomiast kolagen typu IV pochodzenia ludzkiego i mysiego – w temperaturze –70°C. W przypadku produktów zamrożonych należy ograniczyć liczbę cykli zamrażania i rozmrażania, ponieważ mogą one wpływać na stabilność i właściwości białka.